微生物检验结果常见问题解答

在临床上，常见的致病菌或条件致病菌有很多种类，根据对氧气的需求可以分为需氧菌、微需养菌、兼性需养菌、兼性厌氧菌、厌氧菌；根据对培养基的要求可以分为苛养菌和非苛养菌。苛养菌对培养条件要求苛刻，例如流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌艰难梭菌等，非苛养菌对培养条件要求不高，一般实验室可以做到。目前大多数实验室只能针对需氧菌中的非苛养菌进行培养、鉴定及药敏试验，这就引发了一系列的问题，例如细菌涂片镜检报告与细菌培养报告结果矛盾，细菌培养报告与临床不符等。因此，我科微生物室工作人员特就这些问题做出解答，并提出一些解决方案。

1.问：临床经常发现脑膜炎疑似患者，而脑脊液培养结果常为阴性，为什么？

 答：引起脑膜炎的常见细菌为脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、大肠杆菌、结核杆菌等等，脑膜炎奈瑟菌的培养需要5%的二氧化碳和巧克力培养皿，流感嗜血杆菌需要特殊的营养因子，结核杆菌需要专用培养基，这些条件多数医院无法做到。临床在采集脑脊液标本时，可以另外留取一部分做细菌、结核菌和真菌涂片检测，如果确实需要做培养，需要根据培养的种类另外交费，送外院检验，我们医院开展的是普通细菌培养。

2.问：临床常见的脓肿，抽出来的脓液常为恶臭味，但细菌培养结果为无细菌生长，为什么？

  答：脓肿的原因多种多样，有病毒、肿瘤、寄生虫等引起的无菌性坏死，也有真菌感染或自身免疫原因引起的坏死，但这些一般没有恶臭味，最常见的原因是细菌感染。厌氧菌和苛养菌培养目前大多数实验室都没有条件开展，建议同时进行细菌涂片检验和细菌培养，如果细菌涂片阳性而细菌培养阴性，则为厌氧菌或其他苛养菌感染，如果细菌涂片阴性而细菌培养阳性，则为污染。

3.问：严重腹泻患者粪便培养大多数为阴性，为什么？

 答：正常粪便中的菌群多种多样，包括乳酸杆菌、双歧杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、枯草杆菌、葡萄球菌、链球菌、肠杆菌、酵母菌等，其中主要为革兰阳性杆菌，占80%左右，其次为肠球菌。长期使用抗生素、肿瘤、手术等多种原因都可以引起菌群比例倒置，引起希便、水样便甚至脓血便。但是在临床上，除伤寒杆菌、霍乱弧菌和痢疾杆菌之外，其他细菌一般都不作为致病菌报告。如果怀疑肠道菌群紊乱，可以通过粪便细菌涂片证实。

4.问：目前临床上厌氧菌和苛养菌感染率如何？

答：三分之一以上的感染患者单独或伴发厌氧菌、兼性厌氧菌、苛养菌感染。需氧菌感染后将氧耗尽，能够促进厌氧菌、兼性厌氧菌的生长；金黄色葡萄球菌感染能促进流感嗜血杆菌的生长，因为金黄色葡萄球菌能够为流感嗜血杆菌提供X因子和K因子。

5.问：尿液细菌培养与尿常规结果有时候不相符，为什么？

答：结果不相符的原因比较多，如标本污染、抗生素的使用、厌氧菌或苛养菌感染、尿液中其他化学成分的干扰等，现就以下常见不相符情况作出分析。

 （1）尿白细胞增多而尿培养阴性。白带污染会使尿液白细胞假性增多，白带中的上皮细胞中含有少量粒细胞酯酶，会使白细胞干化学结果呈现假阳性。泌尿道厌氧菌或苛养菌感染，普通培养不会得到阳性结果。尿道支原体、衣原体、滴虫等病原体感染时尿液白细胞会增多，但细菌培养结果一般为阴性；淋球菌性尿道炎患者尿培养为阴性，因为淋球菌在普通培养条件下无法生长；尿路感染患者大剂量使用抗生素后，尿培养结果容易出现假阴性。

（2）尿白细胞正常而尿培养阳性。不正确的留尿方法或污染的容器会造成尿培养假阳性；尿标本放置时间过长，使极少量的尿道口污染菌大量增殖，破坏白细胞，酯酶失活，使尿常规中白细胞假阴性而尿培养出现假阳性；大量饮水后，尿液被稀释白细胞出现假阴性；

（3）尿常规与尿培养均阴性，但患者有尿路感染症状。轻度的支原体、衣原体、病毒、淋球菌感染患者尿液白细胞可以为正常，但这些病原体一般条件又难以培养。尿道口或下尿道炎症应留取前段尿，中后段尿中白细胞和病原体数量少，容易出现假阴性。尿道口炎症最好留取尿道拭子，革兰染色判断细菌种类，超高倍显微镜分析支原体、衣原体，甚至采用培养方法，这些项目在本院检验科都能做。

（4）尿常规和尿培养均阳性，但临床无尿道感染症状。尿液受到白带污染容易出现这种现象。

6.结核病患者痰涂片阴性，如何解释？

答：肺结核患者并不是每次取痰都能出现阳性，如检查3次以上均为阴性，可以认为该患者传染性很小。

7．患者临床证实无结核病，但痰或胸腹水抗酸染色阳性，怎么回事？

答：结核杆菌属于分枝杆菌，分枝杆菌抗酸染色阳性，因此又叫抗酸杆菌。目前临床上结核分枝杆菌感染的诊断以抗酸染色结果为主要参考依据。但是，抗酸染色阳性的杆菌不一定全是结核菌，对人类具有致病性的抗酸杆菌包括人型分枝杆菌和牛型分枝杆菌和麻风分枝杆菌，人型分枝杆菌和牛型分枝杆菌主要引起结核病，麻风分枝杆菌主要引起麻风病。其他如戈登分枝杆菌、鸟复合分枝杆菌、海分枝杆菌等致病性很弱或不致病，偶可引起感染。长期肝硬化患者免疫力低下，腹水中抗酸杆菌可以呈现一过性阳性，也可继发结核病。

8.痰液细菌涂片结果和细菌培养结果有时不一致，为什么？

答：如上所述，厌氧菌和苛养菌广泛分布于消化道、呼吸道、生殖道、体表等，因此痰液细菌涂片结果和细菌培养常可出现以下结果：

（1）标本直接涂片镜检发现有病原菌，细菌培养结果为无致病菌生长。这种情况多为口腔污染或厌氧菌、苛养菌感染，如临床有异议，可按正确方法留取无污染标本复查细菌涂片结果。

（2）标本直接涂片镜检未发现病原菌，细菌培养结果为阳性。痰液中唾液污染过于严重会导致这种结果，如果培养结果与临床也不符合，应全部重做。因此发现不合格标本应立即退回重留。如果细菌培养结果与临床基本符合，应以细菌培养结果为准。

（3）标本直接涂片镜检和细菌培养结果均为阴性，但患者有感染症状。此情况多为非细菌性感染，如病毒、支原体、衣原体等，或者标本不合格，当然也少数漏检情况，应结合患者状况具体分析。

（4）标本直接涂片镜检和细菌培养结果均为阳性，但患者无感染症状。多为标本污染。

（5）标本直接涂片镜检和细菌培养结果一致，与临床符合。多数标本为这样的结果。

（6）标本直接涂片镜检发现两种或两种以上病原菌，而细菌培养为一种病原菌。检验科一般只取主要致病菌做鉴定和药敏试验，如需要全部鉴定，请与细菌室联系。

总之，如果标本非常合格，标本直接涂片镜检和细菌培养结果多数情况下比较一致，也与临床符合，若标本直接涂片镜检和细菌培养均阴性，而临床发现有感染症状，应考虑其他病原体感染；若标本直接涂片镜检阳性而细菌培养均阴性，应考虑厌氧菌或苛养菌的感染。

9.临床怀疑曲霉菌感染，而细菌涂片和培养均阴性，临床应怎么办？

答：细菌涂片和培养不一定能查出曲霉菌感染，临床应采血，申请G试验和GM试验，具体情况请联系检验科。

检验科  李继刚