临床解读：人类免疫缺陷病毒（HIV）检测

1.HIV是获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS,简称艾滋病)的病原体。对HIV敏感的细胞都带有OKT4/Leu3a麦型受体，最重要的靶细胞是CD4+淋巴细胞。

2.HIV在体内的潜伏期为1~10年，平均5~8年，感染HIV在10年内发展为艾滋病的患者在发病后5年内死亡。艾滋病患者的特征是B淋巴细胞相对正常，T淋巴细胞显著减少，辅助性T细胞(CD4+)减少，抑制性T胞(CD8+)增加或正常，CD4+/CD8+下降。

3.HIV感染后的临床疾病谱非常广。由于免疫功能遭受破坏，艾滋病患者易患各种机会性感染，主要的病原体有卡氏肺抱子菌、鸟型分枝杆菌、CMV等。

4.HIV在室温可保存活力达7d。HIV对理化因素的抵抗力较弱。耐碱、不耐酸，56℃30min可使病毒的酶破坏，但不能完全灭活血清中的HIV60℃3h或80℃30min可使病毒感染性消失。HIV对射线有抵抗力。

对化学试剂敏感：0.5%次氯酸钠、70%乙醇、0.1%含氯石灰、5%苯酚、0.3%过氧化氢或0.5%甲酚溶液处理5min，对病毒均有灭活作用。

5.HIV的传染源是HIV携带者和艾滋病患者。从其血液、精液、阴道分泌物、乳汁、唾液、脑脊液、骨髓、皮肤及中枢神经组织标本中均可分离到HIV病毒。传播方式主要有三种：

①通过同性或异性间的性接触传播；

②输人含HIV 的血液或血制品、器官或骨髓移植、人工授精、静脉药瘾者共用污染的注射器及针头；

③母婴垂直传播，包括经胎盘、产道或经哺乳等方式引起的传播。

日常生活接触不传播HIV，即以下行为不传播HIV：握手、接吻、共餐生活在同一间房或办公室、共用电话、接触门把、便具、汗液、泪液及蚊子或其他昆虫叮咬。

6.检测HIV的方法有很多，包括检测HIV抗体、HIV抗原和HIVRNA，检测抗体是临床实验室常规使用的诊断方法，其他方法一般仅用做抗体检测方法的验证和补充。

检测HIV抗体的方法有多种，根据方法学分有酶联法、快速法和简单法。根据检测的程序分类有初筛方法和确认方法确认试验又有蛋白质(免疫)印迹法、间接免疫荧光法和放射免疫沉淀法等实际应用时可以根据用途，检测条件、检测对象和检测目的选择不同的检方法。需要注意的是必须使用国家正式批准、鉴定合格的试剂。

7.没有一种检测方法是绝对准确的，而HIV检测又要求有尽可能高的准确性，任何一种错误的结论，不论是假阳性还是假阴性都有十分严重的后果。

为了最大限度地保证检测结果的准确性，HIV检测采用待殊的策略，用敏感性高的方法初筛以后，再用特异性强的方法进行确认。HIV 初筛检测的目的是发现所有的阳性者，要求具有较高的敏感性，因而难免出现假阳性。

为了识别真正的阳性，排除假阳性，对初筛阳性的结果必须用特异性好的方法确认才能下结论。因此 ELISA 阳性的结果不是最终的结果，必须用蛋白质印迹法试验确认后，方可确认阳性或排除假阳性结果。

8.HIV筛查实验的基本程序是

①初筛试验：标本验收合格后，用初筛试剂进行抗体检测，如呈阴性反应，报告 HIV 抗体阴性；对呈阳性反应的标本须进行重复检测。

②重复检测：对初筛试验呈阳性反应的标本，用两种不同原理或不同厂家的试剂重复检测，如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认。应尽可能将重新采集的受检者血液标本和原有标本一并送检。

9.ELISA法检测抗HIV阳性而确认实验阴性是 HIV检测经常出现的情况，说明ELISA的阳性结果为假阳性。

假阳性反应的原因多数尚不清楚经验证明，一些含有针对 HLA 抗原的抗体和患自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、风湿病等)寄生虫病(如疟疾等)、其他病毒病(如病毒性肝炎等)患者以及孕妇经常输血的患者的血清标本容易出现假阳性。越是在传染病流行率高、病种复杂的地区，发生假阳性反应者越多，这可能是由于一些传染病病原体与 HIV某些抗原决定簇有交叉反应在分析初筛试验结果时必须考虑到这此因素。

10.HIV确认实验的结果“HIV抗体不确定”，指的是HIV 抗体确认不是阴性，但又不能满足判断阳性的标准。

不仅初筛阳性的标本可以出现不确定的结果，初筛阴性的标本做确认检测时也有大约15%出现不确定结果，原因一般有两个方面：一种情况可能是处于HIV感染的早期，在这一时期HIV抗体应答还不完善，特征性的抗体还没有出现；另一种情况是假阳性，对不确定结果都应进行随访，随访时间为1~6个月。

如果6个月以后，带型消失或没有进展，可以排除HIV感染；如果在随访的过程中出现了带型的进展，特别是出现了包膜抗原的条带，可以确定是早期HIV感染。持续的不确定结果则提示非特异反应，如高球蛋白血症，饮食或由于其他病原微生物感染导致存在交叉反应的抗体等。

11.常用的检测HIV感染的方法是检测血液中的HIV抗体，但是抗体不是感染以后立刻就会在血液中出现，抗体产生并达到能够检测的水平需要定的时间，这个时期一般称为窗口期。

因此有过危险行为者需要等窗口期过了以后再检测。多数人在感染以后3个月内可以产生抗体，平均是1个月，个别情况下可能延迟到6个月，因此，现在一般推荐在可疑感染后3个月和6个月各检测1次，6个月以后检测HIV抗体阴性基本可以确认没有感染HIV。

12.抗-HIV检测不适用于婴儿感染的早期诊断，这是因为婴儿可以在出生前通过胎盘和出生后通过乳汁被动获得母体的抗-HIV IgG，在出生后8~14个月抗体逐渐消失，18个月以后，婴儿的免疫系统才能产生自己的抗体。

因此，HIV阳性母亲所生婴儿检出抗-HIV不一定表明已受到HIV感染。动态观察HIV阳性母亲所生婴儿的抗-HIV，将发现出生后其抗-HIV为阳性，经过一段时间后，抗体将会转为阴性。

如果18个月以后，婴儿的血清又出现 HIV抗体阳性反应，提示婴儿真正感染了病毒。检测HIV的核心蛋白(P24)、PCR 方法检测HIV核酸和HIV的体外分离培养有助于婴儿HIV感染的早期诊断。P24出现于感染的早期，此时感染者具有高度的传染性，当P24抗体出现时，P24与其结合形成免疫复合物，P24不再能被检测到。到AIDS的晚期，P24抗体的滴度下降，P24又出现。

P24的检测有助于多数急性感染者血清抗体阳转之前的诊断，大约可使抗体的窗口期缩短1周，抗原检测的阳性结果，特别是抗体阴性者的抗原阳性结果可以有效地预示早期感染。因此，P24的检测有助于筛选HIV抗体阴性的处于窗口期的HIV感染者，可提高输血安全，P24的检测也有助于新生儿HIV感染的诊断。